产品货号：
KD1205
中文名称：
BY4741感受态细胞
英文名称：
BY4741 Chemically Competent Cell
产品规格：
10×100μL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：-80℃
产品储存：-80℃保存，6个月有效。
产品货号：KD1205
产品组成：
基因型:
MATa his3Δ1 leu2 met15Δ ura3-52
产品说明：
BY4741菌株来源于酿酒酵母原始菌株——S288C，是实验室的常用菌株，为配子MATa型，广泛应用于钠，钾离子平衡；细胞抗盐；各种金属离子的吸收；重金属毒性；各种糖类，碳源对真核生物细胞生长的影响；过氧化物，超氧化物的吸收与运输的研究中。BY4741酿酒酵母为组氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、尿嘧啶缺陷型菌株，可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入BY4741细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA板板进行筛选。BY4741感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存六个月，pYES2质粒检测转化效率>103 cfu/μg DNA。
使用方法：
1.取100μL冰上融化的BY4741感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒1～3μg，Carrier DNA (96℃水浴3min，快速冰浴3min，重复一次) 10μL，PEG/LiAc 500μL并吸打几次混匀，30℃水浴30min (15min时翻转6～8次混匀)。
2.将感受态移到42℃水浴15min (7.5min时翻转6～8次混匀)。
3.5000rpm离心40 s弃上清，ddH2O 400μL重悬，离心30s弃上清。
4.ddH2O 50μL重悬，涂板，29℃培养48-96h。
5.筛选培养基可选本公司SD系列产品，产品链接(http://www.Biorab.com/Column_Content.asp?Column_ID=48766)
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.若使用pYES2质粒表达蛋白，需在培养基中加入2%的半乳糖(筛选培养基中不用加半乳糖；当需要目的蛋白表达时，需加入半乳糖代替葡萄糖作为碳源)，以诱导目的基因的表达。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
5.酵母为真核生物，不易长期保存，随感受态在-80℃保存时间的延长，转化效率会不断下降，建议保存时间不超过90天。
6.BY4741酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27～30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
7.酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。
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